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2. 1 植物材料 小麦是一种温带长日照植物，适应范围较广，自北纬18°℃～50℃，从平原到海拔4000米的高度（如中国西藏）均有栽培[4]。供试小麦[1]，品种为扬麦10号，该品种春性， 株高95厘米，长芒，白壳，红粒，籽粒饱满，灌浆速度快，熟相好，且抗病、优质、高产[1]。 内容来自www.paper51.com 挑选饱满的具有发芽能力的种子，经过0.1%的HgCl溶液消毒10分钟后，用蒸馏水冲洗干净，于25℃下吸胀12—24小时，然后转移到垫有6-8层湿润滤纸的磁盘中，于28℃/ 25℃（昼/夜）下暗萌发5天[5]。每天补充蒸馏水，以保持滤纸湿润。取萌发的小麦幼苗作为各种的其实材料。 内容来自www.paper51.com 2. 2 研究方法 copyright paper51.com
2. 2. 1 小麦干旱预处理后抗低温能力的交叉研究 copyright paper51.com 本文以小麦幼苗为材料， 研究干旱预处理后低温胁迫下小麦叶片中过氧化氢酶(CAT)活性、丙二醛（MDA）含量的变化[6]。以研究其抗寒性的变化情况。 copyright paper51.com 将上述暗萌发的小麦幼苗进行干旱预处理。把暗萌发后的小麦幼苗分为四盆，每盆400棵。 取1盆置于室温作为对照， 另取 3 盆进行干旱预处理（在室温下进行）。处理过程如下： 3盆分别干旱6小时、12小时、24小时，然后分别恢复7天、8天、9天，计算存活率。 paper51.com 干旱预处理完后，将对照组的小麦幼苗及干旱预处理过小麦幼苗的每一处理置于0℃没有光照的调温冰箱中进行 0天、1天、2天、3天、 4天的低温胁迫处理，恢复一周，计算存活率。 paper51.com
取2g 鲜叶片， 加入 16ｍｌ 62.5 mol/L 磷酸缓冲液（pH7.8）于冰浴研磨， 于 4000 r/min 4℃下离心 20min， 取上清液于 4℃冰箱中保存，分别用于丙二醛（MDA）含量、过氧化氢酶(CAT)活性测定。 copyright paper51.com 2. 2. 2 过氧化氢酶活性的测定 paper51.com 酶液提取[5]：取小麦叶片2.5g加入pH7.8的磷酸缓冲溶液少量，研磨成匀浆，转移至25ml容量瓶中，用该缓冲液冲洗研钵，并将冲洗液转入容量瓶中，用同一缓冲液定容，4000r·min-1离心15min,上清液即为过氧化氢酶的粗提液。 paper51.com
取50ml三角瓶4个(2个测定，2个对照)，测定瓶中加入酶液2.5ml，对照瓶中加入高温处理酶液2.5ml，再加入2.5ml0.1mol01·L-1H202，同时计时，于30℃中保温10min，立即加入10％H2S042.5ml[7]。 内容来自论文无忧网 www.paper51.com 用0.1mol·L—1KMnO4标准溶液滴定H202，至出现粉红色(在30min内不消失)为终点。结果计算：酶活性用每克鲜重样品1min内分解H202的毫克数表示[8]： 内容来自论文无忧网 www.paper51.com 过氧化氢酶活性（H2O2mg/g/min）＝（A－B）×VT/(W×VS×1.7×t) http://www.paper51.com 式中 A—对照KMnO4滴定毫升数(ml) 内容来自www.paper51.com |