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学士学位论文

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云南易门6种野生菌中微量元素含量的研究

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姓    名：

    矣德安                 

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学    号：

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   2007035132     

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院    系：

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   资源环境学院         

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专    业：

   农业资源与环境          

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指导教师：

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     李涛            

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申请学位：

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    农学学士        

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二○一一年五月

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目录

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1 引言... 1

2 实验部分... 2

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2.1实验原理... 2

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2.2实验样品的采集及预处理... 2

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2.3仪器与试剂... 2

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2.4实验步骤... 3

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2.4.1样品的消解... 3

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2.4.2标准曲线的绘制... 4

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2.5样品的测定... 5

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3 结果与分析... 5

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3.1 样品测定结果见表3. 5

3.2 结果分析... 5

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3.2.1 不同产区食用菌中微量元素含量比较... 5

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3.2.2 同一产区食用菌中微量元素含量比较... 6

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4.讨论... 8

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致谢... 9

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参考文献... 10

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云南易门6种野生菌中微量元素含量的研究

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矣德安

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指导教师：李涛

（资源环境学院，环境科学系2007级，农业资源与环境专业 2007035132）

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摘要： 微量元素是食用菌中的重要组成物质。本文采用火焰原子吸收法（AAS）对易门县十街乡马头山地区采集的双色牛肝菌（黄牛肝菌）（Boletus bicolor）、乳牛肝菌（Suillus  bovinus）、绿菇（青头菌）（Russu  lavivesscens）、梭柄松苞菇（Catathe lasma ventricosum）、红黄褶孔牛肝菌 ( Phylloporus  rhodoxanthus)、黑疣柄牛肝菌 （Leccinum nigrescens）等6种野生食用菌中的7种微量元素进行分析测定。结果表明，云南易门地区的6种野生菌中钾、钙、钠、镁、铜的含量较高，锌和铁的含量相对较低。易门县野生菌不同物种间同一元素含量差异大，其中钾元素在梭柄松苞菇、红黄褶孔牛肝菌和绿菇中含量较高；黑疣柄牛肝菌中钙、钠元素含量较高，乳牛肝菌中钙含量最低，镁元素在绿菇中含量最高，钠元素含量则最低。与前人研究结果比较，易门县6种野生食用菌中钾、钙、钠、镁的含量丰富，双色牛肝菌， 黑疣柄牛肝菌,绿菇,梭柄松苞菇具有较大的开发前景及食用价值。

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关键词：火焰原子吸收法；野生食用菌；微量元素

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1 引言

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食用菌是一种味道鲜美，营养丰富，具有食药两用的天然食品，特别生长于山林，无污染的野生菌誉为绿色食品，富含多种维生素、蛋白质、微量元素及其有益于人体的活性成分，具有健脑、提高免疫力、抗辐射等诸多保健功效，尤其对抑制癌细胞和治疗糖尿病具有特效([1，2])。近年来，野生菌的食用与药用价值备受研究者的关注。

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食用菌中含有75%-92%的水分，其干物质中，含有92%-97%的有机物质。据报道，在112种食用菌的干物质中，蛋白质平均含量占25%、脂质占8%、糖类占60%，此外，含有丰富的维生素B1（硫胺素）、维生素B2(核黄素)维生素B5（烟酸）、维生素C（抗坏血酸）和维生素D2（麦角固醇）等多种维生素、核酸和微量元素（[1，2，5]）。

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微量元素是野生菌中重要的组成物质，其含量约占3%-12%，其中钾（K）钙（Ca）钠（Na）镁（Mg）铁（Fe）铜（Cu）锌（Zn）等是食用菌及人体必需的营养元素，对食用菌中微量元素的种类与含量的分析已是目前研究的热点。但由于食用菌中铜、锰、铁、锌元素含量较低，用化学分析方法难以准确测定（[ 8，9]），且分析手段多元化，加之样品的来源、种类不同，其微量元素含量差异较大（从表3中可见）。因此，本文采用高温灰化（550℃），火焰原子吸收法测定同一产区（云南易门十街乡马头）6种野生食用菌中7种微量元素含量，并对其含量进行比较，综合评价，为野生食用菌合理开发提供参考依据。

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2 实验部分

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2.1实验原理

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野生菌样品经处理后，导入原子吸收光谱仪中，经火焰原子化后，各种金属元素吸收各自相应的共振线，其吸收量与元素含量成正比，与标准系列比较进行定量分析。根据朗伯比尔定理（A=KCL）求算出样品中微量元素的含量。

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2.2实验样品的采集及预处理

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2.2.1样品来源:易门县十街乡马头山地区

2.2.2将所采集样品洗净，阴干，放置于60℃ 恒温干燥箱中干燥至恒重，粉碎，过80目筛，备用。

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2.3仪器与试剂

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2.3.1仪器

火焰原子吸收分光光度计（S2 AA System）、钾（K）钙（Ca）钠（Na）镁（Mg）铁（Fe）铜（Cu）锌（Zn）单元素空心阴极灯、电子分析天平（AR1140型）、，恒温干燥箱（CS101型电热鼓风干燥箱） 。

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2.3.2试剂

钾（K）钙（Ca）钠（Na）镁（Mg）铁（Fe）铜（Cu）锌（Zn）的标准储备液（国家标准物质中心购买）HCl(分析纯)、HNO3(分析纯)

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2.3.3 仪器工作条件见表1 

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表1 仪器工作条件

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元素

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波长(nm)

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狭缝（nm）

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灯电流（%）

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空气-乙炔流量(L.min-1)

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燃烧器高度(mm)

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K

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Mg

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Zn

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769.5

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0.2

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75

1.2

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10.0

422.7

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75

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10.0

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330.3

0.2

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10.0

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285.2

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0.2

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1.2

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10.0

248.3

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1.2

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324.7

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1.2

10.0

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213.8

0.2

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1.2

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10.0

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2.4实验步骤

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2.4.1样品的消解

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2.4.1.1 将样品置于10*5的铁盒中置于50℃烤箱中过夜，约9个小时。

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2.4.1.2 将恒重样置于干燥器中，精确称取0.5000g于20mL瓷坩埚中，每个样品做3个平行，加入一定量HNO3浸泡８小时，置于电炉上小火加热挥干，冷却到室温后置于马弗炉中，在550℃下灰化4h（[7][8][9]）。

2.4.1.3 用5mL0.1mol/L的HCL溶解样品灰分，把坩埚里的灰分用去离子水清洗3次，转入25mL 的比色管中，定容，同时做空白对照。

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把比色管按样品标号放在试管架沉淀，澄清液后用2 AASystem型火焰原子吸收分光光度计进样分析。

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2.4.2标准曲线的绘制

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2.4.2.1 配制标准使用液:根据各元素所需的浓度准确量取标准储备液，转移至100 mL 容量瓶中，用去离子水定容；配置标准序列浓度，各标准曲线液配制浓度、标准曲线方程见表2。

表2 标准曲线液配制液浓度、吸光度及标准曲线方程

元素

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项目

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浓度及Abs梯度

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线性方程及拟合度

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K

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C（ppm）

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0

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2

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—

—

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y = 0.0279x + 0.0049

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Abs

0.0003

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0.0272

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0.0627

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0.1314

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0.1724

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0.2218

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0.2823

—

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—

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R2 = 0.9951

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Ca

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C（ppm）

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y = 0.006x - 0.001

R2 = 0.9959

Abs

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0

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0.0045

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0.0086

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0.0239

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0.0364

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0.0453

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0.0585

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—

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Na

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C（ppm）

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0.25

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R2 = 0.9936

Abs

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0

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0.0749

0.1675

0.3085

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0.5110

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0.8358

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0.9665

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1.2538

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—

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Mg

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C（ppm）

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0

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y = 0.072x + 0.0264

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R2 = 0.9953

Abs

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0.0008

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0.0909

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0.1905

0.3363

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0.4718

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0.5902

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0.7356

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Fe

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—

y = 0.0187x - 0.005

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R2 = 0.9966

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Abs

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-0.0050

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0.0127

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0.0324

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0.0698

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0.1072

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0.1446

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0.1820

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—

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Cu

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0.04

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0.06

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0.08

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0.1

0.2

0.4

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0.6

0.8

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y=0.0622x - 0.0005

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R2 = 0.9996

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Abs

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0

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0.0060

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0.0086

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0.0095

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0.0099

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0.0303

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0.0537

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0.0781

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0.1039

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Zu

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0

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0.4

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1

1.5

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y = 0.1305x + 0.0003

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R2 = 0.9971

Abs

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0

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0.0118

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0.0255

0.0364

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0.0485

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0.0605

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0.0922

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0.125

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2.5样品的测定

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将消解处理后的试样溶液、试剂空白液分别导入火焰原子吸收分光光度计中进行测定

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3 结果与分析

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3.1 样品测定结果见表3

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表3  易门野生食用菌微量元素的含量测定值

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种类

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K

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(mg/100g)

Ca

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Na

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(mg/100g)

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Cu

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(mg/100g)

Zn

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(mg/100g)

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双色牛肝菌

345.68

29.88

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14.58

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92.5722

0.84

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1.38

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0.0567

红黄褶孔牛肝菌

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372.11

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34.50

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9.40

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92.4194

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1.46

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2.02

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0.0414

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黑疣柄牛肝菌

338.25

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44.63

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22.74

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92.2889

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3.87

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2.77

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0.0521

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乳牛肝菌

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341.88

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12.03

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14.12

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89.8278

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1.47

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3.53

0.0996

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绿菇

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373.20

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23.13

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9.23

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99.4806

0.98

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0.78

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0.0260

梭柄松苞菇

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384.80

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33.73

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12.57

96.2778

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5.20

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3.27

0.0873

3.2 结果分析

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3.2.1 不同产区食用菌中微量元素含量比较

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表4  不同地区几种野生食用菌微量元素的含量(引用)

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种类       

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K

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Ca

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Na

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Mg

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Fe

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(mg/100g)

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Cu

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(mg/100g)

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Zn

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(mg/100g)

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产地及备注

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小美牛肝菌

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295

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4

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1.6

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9

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1.7

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0.43

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0.42

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云南安宁及禄丰[10]

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铜色牛肝菌

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2

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1.3

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8

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2.1

0.37

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1.01

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黄皮疣柄牛肝

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2

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1.6

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0.35

0.67

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美味牛肝菌

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2.1

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0.32

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多汁乳菇

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1.2

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0.26

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云南安宁及禄丰[11]

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红汁乳菇

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203

3

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1.1

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4.7

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0.08

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绿菇

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4

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1.1

8

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1.4

0.34

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0.67

松乳菇

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7

1.7

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11

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20.4

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0.12

1.10

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小美牛肝菌

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2133.647

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45．031

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117．624

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80．763

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56．344

——

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9．872

云南兰坪县 [12]

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黄褐牛肝菌

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765.435

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17.796

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164．28

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90.926

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17．154

18．412

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10．201

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云南兰坪县金顶镇[13]

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黄靛牛肝菌

163.000

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0.40

——

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49.34

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5.10

——

6.83

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浙江庆元县岭头乡杨家庄村[14]

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黄伞

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217.0

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38.6

160

66.8

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40.2

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——

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4.66

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河南省内乡县[15]

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本论文所测7种微量元素含量(表3)与前人研究结果（表4）比较显示，含量差异较大，其中云南易门地区的6种野生菌中钾、钙、钠、镁、铜的含量较高，锌和铁的含量相对较低。

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同时通过查阅资料发现某某地区旱地有效锌含量为痕迹～30. 00mg/ kg，平均1. 31mg/ kg (95 %CL 1. 12～1. 50mg/ kg), 土类为低水平含量[16]。而此次分析中锌的含量都偏低，只有0.6mg/100g左右的含量，野生菌中的锌含量明显低于前人做过的值,由此可见该地区土壤中锌的含量较少,通过植物,菌类的不断吸收减少，在菌类中的含量明显减少,由此本人认为菌类中无机元素的含量在一定程度上可以反映但地土壤的矿质营养状况。

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3.2.2 同一产区食用菌中微量元素含量比较

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双色牛肝菌，红黄褶孔牛肝菌， 黑疣柄牛肝菌，乳牛肝菌，绿菇，梭柄松苞菇中7种微量元素含量见图1-7。

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　　　图1 不同食用菌中k元素平均含量及正偏差

图1显示，K元素含量梭柄松苞菇>红黄褶孔牛肝菌>绿菇>双色牛肝菌>乳牛肝菌>黑疣柄牛肝菌，平均含量为359.32mg/100g，其含量差异较大。

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　　　图2不同食用菌中Ca元素平均含量及正偏差

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由图2可知，乳牛肝菌中Ca含量最少，黑疣柄牛肝菌中含量最高，其含量相差32.6mg/100g。同一产区不同食用菌中Ca元素含量差异较大。

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　　图3不同食用菌中Na元素平均含量及正偏差

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由图3可知，所测6种野生菌中钠元素的平均含量为13.8mg/100g，黑疣柄牛肝菌中Na元素含量最高，绿菇中含量最低。

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　　　　图4不同食用菌中Mg元素平均含量及正偏差

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由图4所示，所测地区不同野生菌中Mg含量较为丰富，平均含量高达94mg/100g，其中绿菇中含量较为丰富。

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　　　　　图5不同食用菌中Fe元素平均含量及正偏差

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由图5所示，所测6种野生菌中，Fe含量差距较大，其牛肝菌属，黑疣柄牛肝菌和双色牛肝菌中Fe元素含量分别为3.87mg/100g，和0.84mg/100g，相差3倍之多；而梭柄松苞菇中含量最高为5.2mg/100g。

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　　　　　　图6不同食用菌中Cu元素平均含量及正偏差

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　　　　　　图7不同食用菌中Zn元素平均含量及正偏差

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由图6，7可知，该产区6种食用菌中Cu含量差异不明显，与前人所测含量相比Zn元素含量较低，不同菌类之间差异较明显。

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易门县野生菌不同物种间同一元素含量差异大，其中钾元素在梭柄松苞菇、红黄褶孔牛肝菌和绿菇中含量较高；黑疣柄牛肝菌中钙、钠元素含量较高，乳牛肝菌中钙含量最低，镁元素在绿菇中含量最高，钠元素含量则最低。同一产区6种野生食用菌中，如：梭柄松苞菇，双色牛肝菌， 黑疣柄牛肝菌中所富集的7种人体必需微量元素含量较其他菌类高，具有很大的开发潜力。

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4.讨论

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本论文通过干灰化法处理，AAS法对某某市易门县十街乡马头山地区6种野生食用菌子实体样品中7种微量元素的进行测定，并与前人所测数据相比，结果差异较大，表明该产区6种食用菌中富含有丰富钾、钙、钠、镁等的微量元素。

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本实验分析方法简便、快捷、准确，微量元素作为食用菌质量评价的重要指标之一，为食用菌安全食用及其药理活性具有重要的评价意义。同时野生菌微量元素分析研究是一项非常基础也非常有必要的研究,其研究成果能对食用菌食品营养，食品安全，野生菌驯化等领域将有很多的帮组及启示。

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本实验分析结果表明，同一产区不同食用菌及不同产区同一食用菌中微量元素含量均有一定差异，分析结果显示野生菌作为一种异养大型真菌子实体,营养物质主要从腐殖质和土壤中获得,在元素上的差异大小不一,如钾元素,在实验的六种菌中平均含量360mg/100g,含量最高最低之差只有46.65mg/100g；而像钙、镁这类对真菌很重要的元素,不同菌种之间差别很大, 钙含量最高为黑疣柄牛肝菌44.63mg/100g,最低为乳牛肝菌只有12.03mg/100g, 同隶属于伞菌目牛肝菌科而差距将近4倍, 而镁含量最高为青头菌99.48mg/100g,最低为乳牛肝菌只有89.83mg/100g,含量非常丰富 , 对于真菌，钙是某些酶的激活剂，对维持细胞蛋白质的分子结构有一定作用，还与控制细胞的透性有，其对子实体的硬强度有影响，钙能提高细胞壁的强度，提高子实体的抗机械损伤能力；镁主要影响酶系统的活性，是己糖磷酸化酶、异柠檬酸脱氢酶、肽酶、羧化酶以及与磷酸代谢有关的酶的激活剂。镁在细胞中还起着稳定核糖、细胞膜和核酸的作用[11]。两种如此重要的元素在乳牛肝菌的含量都低,这是否是影乳牛肝菌不耐贮藏,食用口感不好,加工品质不好等的原因,这是一个非常值得探讨的问题。

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其含量差异可能是由于食用菌遗传及生长环境差异共同作用的结果，但差异机理仍需进一步研究。

致谢

在我做毕业论文实验和写作过程中，我的指导老师李涛老师给予我许多具体细致的帮助，在选题时给我很大的指导，给我提出了很多宝贵的意见；在实验方面袁天军老师给了我许多具体的指导和帮助；云南农科院药用植物研究所金航所长，张金渝副所长，王元忠、张霁、赵艳丽等老师，云南大学沈涛师兄，云南民族大学袁天军师兄对我的毕业论文给以了许多的指导。在此我向所有帮组过我的老师致以最诚挚的敬意和衷心的感谢！同时感谢母校-某某师范学院四年来对我的培养！

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The content of trace elementsresearch in 6 kinds of wild edible fungus atthe Yi-Men township in Yun-Nan province

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Yi de-an

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Instructor: Li tao

( Agricultural resources and environment， Resources and Environmental College， YuxiNormal University，Yuxi 653100)

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Abstract:This papercontent of 7 trace elements for Boletus bicolor，Suillus bovinus， Russu lavivesscens， ventricosum， Phylloporus rhodoxanthus， and nigrescens by flame atomicabsorption spectrophotometry (AAS) at the Ma-Tou shijie region Yi- men townshipin Yun-Nan province. The results showed that the content of potassium， calcium and sodium， magnesium and copper are higher， Suillus bovinus and iron are relativelylower at the Yi- men region in Yun-Nan province. The content of the same traceelements have larger difference in wild edible fungus at the Yi- men region.The content of potassium were higher in the Catathe lasma ventricosum， Phylloporus rhodoxanthus and Russu lavivesscens， but the content of calcium and magnesiumwere richer in the Leccinum nigrescens; the content of calcium was the lowestin the Suillus bovinus; the content of zice was the higgest but the content ofsodium was the lowest in the Russu lavivesscens. The concentrations of thepotassium， calcium and sodium， magnesium were richer the predecessorsresearch at the Yi-Men region，this results have better fordevelopment prospects and edible value.

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Key words: Flame atomicabsorption spectrometric method; Wild edible fungus; Trace elements

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